Naslov (srp)

Distribucija mutacija u F8 genu kod pacijenata iz Srbije obolelih od hemofilije A : doktorska disertacija

Autor

Ilić, Nina S., 1978-

Doprinosi

Guć-Šćekić, Marija
Tanić, Nasta
Veljković, Dobrila
Kuzmanović, Miloš, 1966-
Zeljić, Katarina

Opis (srp)

Uvod: Hemofilija A (HA) je X-vezano recesivno oboljenje, koje spada u grupu koagulopatija. Nastaje kao posledica mutacija u F8 genu (Xq28) i javlja se sa uĉestalost od 1:5 000 muškaraca. U cilju odreĊivanja distribucije mutacija kod obolelih od HA sa teritorije Srbije, u ovoj studiji sprovedene su analize za detekciju specifiĉnih mutacija: inverzije introna 1 (inv1) i introna 22 (inv22) , kao i velikih delecija i duplikacija i taĉkastih mutacija gena F8. Materijal i metode: Istraţivanje je sprovedeno na uzorku od 71 pacijenta, muškog pola, koji su upućeni sa dijagnozom HA u Laboratoriju za medicinsku genetiku Instituta za zdravstvenu zaštitu majke i deteta Srbije ,,Dr Vukan Ĉupićˮ. Analize za detekciju inv22, delecija i duplikacija introna 22 i inv1, sprovedene su kod ĉitave grupe od 71 pacijenta primenom IS-PCRa. U cilju detekcije velikih delecija i duplikacija kodirajućeg regiona F8 gena, korišćena je MLPA metoda, a obraĊena je grupa od 20/71 pacijenata negativnih za inv22 i inv1. Presekvencioni skrining, sproveden SSCP metodom, obuhvatio je pacijente sa negativnim statusom u prethodnim testiranjima (46/71), a izdvojena su tri pacijenta kod kojih je sumnja na postojanje taĉkaste mutacije proverena metodom sekvenciranja. Detekcija statusa nosilaca mutacija uraĊena je kod 46 ĉlanova porodica obolelih (15 majki, 23 sestre i 4 ćerke obolelih). Ove analize omogućile su davanje adekvatnog genetiĉkog saveta i prenatalnu dijagnostiku HA kod 6 trudnica u 9 trudnoća. Statistiĉka analiza dobijenih rezultata sprovedena je metodom Hi kvadrat testa. Rezultati i diskusija: Rezultati studije su pokazali uĉestalost inv22 od 28,1% (20/71) (tip1 22,5 % (16/71) , tip2 5,6% (4/71)) i inv1 od 4,2 % (3/71) dok delecije i duplikacije introna 22 nisu detektovane. Detektovane su velike delecije sa uĉestalošću od 15% (3/20); kod jednog pacijenta je uoĉeno postojanje delecije egzona 7 , a kod dva delecija egzona 2-3. Prisustvo taĉkastih mutacija, missense tipa (c.6532C>T ) i delecije (c.1332_1332delA) definisano je kod dva (2/71; 2,8%) pacijenta...

Opis (srp)

Biologija - Medicinska genetika / Biology - Medical genetics Datum odbrane: 27.01.2015

Opis (eng)

Introduction: Hemophilia A (HA) is a common X-linked recessive bleeding disorder, with incidence of 1 in 5 000 male and caused by mutations of F8 gene (Xq28). In order to detect the distribution of F8 mutations in Serbian HA population, , the analyses for detection of recurrent inversions of intron 1 (inv1) and intron 22 (inv22) of F8, large deletions and duplications and point mutations, were performed in this study. Matherial and methods:The investigation considered the cohort of 71 male paitents, whose blood samples was colected at the Laboratory for Medical Genetics, Mother and Child Health Care Institute of Serbia “Dr Vukan Cupic” (IMD) with HA diagnosis. Detection of the inv 22, inv1 and duplications and the deletions of intron 22, were performed using IS-PCR for entire group of HA patients. The group of 20 patients, with negative inv22 and inv1 status, were analysed for the presence of large detetions and duplications of coding region of F8 gene, using MLPA. Next step was the pre-sequencing screening for point mutations, using SSCP, for 46 patients with previous negative mutation status. Carrier status testing were obtained for 46 relatives (15 mothers, 23 sisters and 4 daughters) and allowed adequate genetic concealing and prenatal diagnostic in 9 pregnancies.Statistic analyses were performed using chi-squared test. Results and discussion: The results showed the inv22 frequency of 28,1% (20/71) (type1 22,5 % (16/71) and type 2 5,6% (4/71)) and inv1 frequency of 4,2 % (3/71). No deletions or duplications were detected. The large deletions was detected in 15% ( 3/20) of patientes ; one patient with deletion of exon 7 and two patientes with deletion of exon 2-3. The sequencing analyses in 3/46 of them showed one missense mutation ((c.6532C>T ) and one deletion (c.1332_1332delA). The distribution of the detected mutation was matched with clinical caracteristics: severity of the disease and pressence of FVIII inhibitor. Analysis for clinical severity of the disease, showed the occurience of inv22 in 39,1% (18/46) patients with severe and 14,3 % (2/14) patientes with moderate HA. Inv22 genotype was not found in patientes with mild HA...

Jezik

srpski

Datum

2014

Licenca

Ovo delo je licencirano pod uslovima licence
Creative Commons CC BY-NC-ND 2.0 AT - Creative Commons Autorstvo - Nekomercijalno - Bez prerada 2.0 Austria License.

http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.0/at/legalcode

Predmet

OSNO - Opšta sistematizacija naučnih oblasti, Molekularna genetika

hemofilija A, inv22, inv1, velike delecije, taĉkaste mutacije, IS-PCR, MLPA, uĉestalost, Srbija

577.2:616.151.5(497.11)(043.3)

OSNO - Opšta sistematizacija naučnih oblasti, Molekularna genetika

hemophilia A, inv22, inv1, large deletions, point mutations, IS-PCR, MLPA, frequency, Serbia