Naslov (srp)

Interakcija mitogenom aktiviranih protein kinaza i autofagije u diferencijaciji HL-60 leukemijskih ćelija u makrofage forbol-12-miristat-13-acetatom : doktorska disertacija

Autor

Mandić, Miloš, 1990-

Doprinosi

Ristić, Biljana, 1984-
Trajković, Vladimir, 1967-
Perović, Vladimir, 1975-
Vučićević, Ljubica, 1978-
Andrić, Silvana, 1968-
Misirkić Marjanović, Maja, 1975-
Ćirić, Darko, 1982-

Opis (srp)

Forbol-12-miristat-13-acetat (PMA), aktivator protein kinaze C (PKC), indukuje diferencijacijućelija akutne mijeloidne leukemije (AML) u makrofage. Pokazano je da autofagija učestvuje udiferencijaciji ćelija hematopoeze i leukemijskih ćelija. Mitogenom aktivirane protein kinaze(MAPK) mogu da aktiviraju autofagiju i diferencijaciju ćelija. Cilj ove disertacije je da se ispitauloga autofagije i MAPK u diferencijaciji HL-60 leukemijskih ćelija u makrofage pod dejstvomPMA, kao i uloga MAPK u indukciji autofagije. PMA je indukovala diferencijaciju HL-60 ćelija umakrofage, što je pokazano povećanom ekspresijom makrofagnih markera CD11b, CD13, CD14,CD45, EGR1, CSF1R i IL-8. Prisustvo autofagije u diferencijaciji HL-60 ćelija pokazano јеdetekcijom zakišeljavanja citoplazme, povećanjem autofagnog fluksa, povećanjem ekspresije ATGgena i oslobađanjem beklina-1 iz kompleksa sa Bcl-2. Autofagija je aktivirana izlaskom autofagnogrepresora ZKSCAN3 iz jedra i ulaskom aktivatora autofagije FOXO1/3 i TFEB u jedro HL-60ćelija. Aktivacija autofagije je nezavisna od AMPK i Akt/mTORC1. Međutim, PMA je aktivacijomPKC dovela do stimulacije ERK i JNK, što je povećalo konverziju LC3-I u LC3-II. Farmakološka igenska inhibicija ERK ili JNK je smanjila konverziju LC3, ekspresiju ATG gena, premeštanjeFOXO1/3 i TFEB u jedro, disocijaciju beklina-1 iz kompleksa sa Bcl-2 i ekspresiju makrofagnihmarkera CD11b, CD45, CSF1R, EGR1 i IL-8. Farmakološka i genska inhibicija autofagije jesprečila diferencijaciju HL-60 ćelija u makrofage. Ovi rezultati ukazuju da ERK i JNK učestvuju udiferencijaciji HL-60 ćelija u makrofage pod dejstvom PMA, aktivacijom autofagije, što predstavljapotencijalnu metu za poboljšanje diferencijacione terapije AML.

Opis (srp)

Medicina - Molekularna medicina / Medicine- Molecular medicine Datum odbrane: 01.03.2023.

Opis (eng)

Protein kinase C (PKC) activator phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA) induces macrophagedifferentiation of acute myeloid leukemia (AML) cells. Autophagy has been shown to participate inthe differentiation of hematopoietic and leukemic cells. It is well known that mitogen-activatedprotein kinases (MAPK) can activate autophagy and cell differentiation. The aim of this thesis is toexamine the role of autophagy and MAPK activation in PMA-induced macrophage differentiationof HL-60 leukemia cells as well as the role of MAPK in the induction of autophagy. PMA inducedmacrophage differentiation of HL-60 cells, as shown by increased expression of macrophagemarkers CD11b, CD13, CD14, CD45, CSF1R, EGR1 and IL-8. The activation of autophagy duringthe differentiation of HL-60 cells has been demonstrated by the increase of cytoplasmicacidification, augmented autophagic flux, increased ATG gene expression, and the release of beclin-1 from the complex with Bcl-2. Autophagy in HL-60 cells has been activated by the cytoplasmictranslocation of the autophagy repressor ZKSCAN3 and nuclear translocation of autophagyactivators FOXO1/3 and TFEB. Stimulation of autophagy was independent of AMPK andAkt/mTORC1 activation. However, PMA activation of PKC stimulated ERK and JNK andincreased the LC3 conversion. Pharmacological and genetic inhibition of ERK or JNK reduced LC3conversion, ATG gene expression, FOXO1/3 and TFEB nuclear translocation and expression ofmacrophage markers CD11b, CD45, CSF1R, EGR1 and IL-8. Inhibition of autophagy suppresseddifferentiation of HL-60 leukemia cells induced by PMA. These results indicate that ERK and JNK-dependent autophagy participates in PMA-induced differentiation of HL-60 cells into macrophages,which represents a potential target for improving AML differentiation therapy.

Jezik

srpski

Datum

2022

Licenca

Creative Commons licenca
Ovo delo je licencirano pod uslovima licence
Creative Commons CC BY-NC-ND 3.0 AT - Creative Commons Autorstvo - Nekomercijalno - Bez prerada 3.0 Austria License.

http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/at/legalcode

Predmet

OSNO - Opšta sistematizacija naučnih oblasti, Klinička hematologija

akutna mijeloidna leukemija, forbol-12-miristat-13-acetat, diferencijacija, autofagija, beklin-1, ERK, JNK

616.155:577.2(043.3)

OSNO - Opšta sistematizacija naučnih oblasti, Klinička hematologija

acute myeloid leukemia, phorbol 12-myristate 13-acetate, differentiation, autophagy, beclin-1, ERK, JNK